Диагностичен тест за ANA (антинуклеарни антитела)

Тестът за антинуклеарни антитела (ANA) се използва като първичен тест за оценка на състоянието на пациента при автоимунни нарушения на съединителната тъкан. Това са нарушения, които засягат много тъкани и органи в цялото тяло. Какво показват резултатите от теста? Какво представляват ANA? Какви заболявания могат да бъдат открити ANA?

Съдържание:

1. ANA тест - какво представляват антинуклеарните антитела?
2. ANA тест - използване при диагностика
3. ANA тест - наличие на ANA в кръвта на здрави хора
4. ANA тест - какво е име?
5. ANA тест - кога трябва да се направи ANA тест?

Съкращението ANA идва от английското наименование анти-ядрени антитела, което се превежда на полски като „антинуклеарни антитела“. Тези молекули принадлежат към протеини, наречени автоантитела, които са протеини, които атакуват тялото, което ги произвежда.

ANA тест - какво представляват антинуклеарните антитела?

Човешкото тяло има много защитни механизми срещу патогени. Един от тях е хуморалният имунитет. Тя се основава на производството на защитни антитела. При здрави хора имунната система произвежда антитела срещу чужди антигени.

Понякога обаче има ситуации, при които се произвеждат автоантигени, които са насочени срещу протеините в собственото ни тяло. Този процес е от съществено значение за генезиса на автоимунни заболявания.

Антинуклеарните антитела атакуват протеини и други молекули, изграждащи ядрото.

Има много различни видове ANA. Разграждането на тези антитела се основава на видовете ядрени компоненти, срещу които са насочени тези молекули. В зависимост от типа, ANA могат да се свързват както с единични протеини, така и със сложни комплекси.

Например има антитела срещу ядрени канали и хистони, т.е.молекули, върху които се навива ДНК.

Атакуващите ANA могат да бъдат разграничени:

• ПОДЪХ
• хистони
• рибонуклеопротеини
• Ядрена РНК
• нехистонови протеини

Всички изброени компоненти са характерни за клетъчното ядро.

АНА присъстват в кръвта по време на различни заболявания. Това включва автоимунни заболявания, рак и някои видове инфекции. Това позволява използването на антинуклеарни антитела при диагностицирането на определени болестни състояния.

ANA тест - използване при диагностика

Тестът ANA се използва за откриване на антинуклеарни автоантитела в кръвта на пациента. Този преглед е важен за диагностика на заболявания като:

• системен лупус еритематозус
• Синдром на Сьогрен
• склеродермия
• полимиозит
• дерматомиозит
• автоимунен хепатит
• предизвикано от лекарствена реакция търкаляне

Положителният резултат от ANA теста е диагностичен само ако има клинични признаци, които го потвърждават. Тестването на нивото на антинуклеарни антитела също може да бъде полезно при проследяване на прогресията на заболяването.

Типичните тестове, използвани за откриване и оценка на ANA, са:

• индиректна имунофлуоресценция
• ELISA-ензимен имуносорбентен тест

Методът на индиректната имунофлуоресценция

Непряката имунофлуоресценция е един от най-често използваните ANA тестове. Обикновено този тест използва Hep-2 клетки. Те се нанасят под формата на тънък слой върху микроскопски диапозитиви. След това серумът, събран от пациента, се поставя върху тях и се инкубира заедно с Hep-2 клетки.

Ако ANAs присъстват в взетата проба, те се откриват след инкубационния период във форма, свързана с антигените в клетъчното ядро. Това може да се види чрез добавяне на флуоресцентен етикет, който се свързва с антителата.

За тази цел най-често се използват флуоресцеин или родопсин В изотиоцианат (FITC) или родопсин В. Молекулата флуоресцира, когато на нея е изложен лъч светлина със специфична дължина на вълната. За наблюдение и оценка на флуоресценцията се използва микроскоп.

В HEp-2 клетките могат да се наблюдават различни модели на флуоресценция в зависимост от вида на антителата в човешкия серум и локализацията на антигена. Техният анализ позволява да се определят видовете антитела, присъстващи в пробата.

Нивата на антителата се определят чрез извършване на серийни разреждания на кръвен серум. ANA тест се счита за положителен, ако се наблюдава флуоресценция при титър 1: 40/1: 80. Резултат над 1: 160 обаче е от значително диагностично значение.

Ензимен имуноанализ (ELISA)

Ензимният имуноанализ (ELISA) използва микротитърни плаки с антигени за откриване на ANA. Всяка ямка на плочата е покрита с един или повече антигени. Това служи за откриване на специфични антитела.

Кръвният серум се инкубира в ямките на плочата и след това се измива. Ако в пробата са присъствали антинуклеарни антитела, те ще останат свързани с подходящите антигени на микротитърната плака след измиване.

В следващата стъпка от теста, второ ензимно свързано антитяло се добавя към ямката на плаката. Ензимната реакция кара разтвора да промени цвета си.

Цветовата разлика е пропорционална на количеството антиген-свързани антитела в ямката на плочата. Цветът на получения разтвор може да бъде оценен чрез спектрофотометричния метод, т.е. чрез измерване на интензивността на светлинния лъч, предаван през разтвора.

ANA тест - наличие на ANA в кръвта на здрави хора

Изчислено е, че при 5% от човешката популация антинуклеарните антитела присъстват в кръвта в концентрация, която се счита за диагностично значима, независимо от наличието на болестното състояние.

Тъй като честотата на ANA се увеличава с възрастта, около 10-37% от здравите хора на възраст над 65 години са положителни за наличие на ANA. Такива случаи са по-чести при жените, отколкото при мъжете.

ANA тест - какво е име?

Характерната стойност за ANA теста е титърът. Той показва степента на разреждане на серума, при която антинуклеарните антитела стават неоткриваеми. Колкото по-висока е концентрацията на ANA в кръвта, толкова по-висок е титърът в резултатите от теста.

Тест за специфичност на антинуклеарни антитела се препоръчва, ако титърът е над 1: 160. Тези допълнителни тестове трябва да се извършват заедно с анализа на клиничната история на пациента и физикалния преглед. Целта на тези стъпки е да диагностицира или изключи автоимунни заболявания.

Трябва да се отбележи обаче, че такъв резултат се наблюдава при 5% от пациентите, независимо от състоянието на заболяването. Резултатът от теста е диагностичен само когато има други симптоми на заболяването.

Отрицателният резултат от ANA тест показва, че е малко вероятно пациентът да има лупус или друго автоимунно заболяване.

ANA тест - кога трябва да се направи ANA тест?

Тестът ANA се назначава, когато симптомите на пациента показват системно автоимунно разстройство. Те могат да бъдат много неочевидни и неспецифични и могат да се променят с течение на времето.

Примерите за симптоми включват:

• Нискостепенна треска
• Постоянна умора
• Болка, подобна на артрит
• Червен обрив
• Кожна чувствителност към светлина
• Косопад
• Болки в мускулите
• Изтръпване или изтръпване на ръцете или краката
• Възпаление на органи и тъкани (бъбреци, бели дробове, сърце, сърдечна лигавица, централна нервна система или кръвоносни съдове)

Литература:

1. https://labtestsonline.org/tests/antinuclear-antibody-ana
2. "Медицински предметни заглавия". Национална медицинска библиотека. 12 февруари 2013 г.
3. "Тестът за антинуклеарни антитела: какво означава". Фондация Лупус в Америка. Посетен на 7 юни 2013
4. Кумар, Y; Бхатия, А; Minz, RW (2 януари 2009 г.). "Антинуклеарни антитела и техните методи за откриване при диагностика на заболявания на съединителната тъкан: преглед на пътуването". Диагностична патология
5. www.autopróbciala.info
6. Кавано, Артър, Томар, Ръсел, Ревей, Джон, Соломон, Даниел Х. и др. Насоки за клинична употреба на теста за антинуклеарни антитела и тестове за специфични автоантитела към ядрени антигени. Архиви на патологията и лабораторната медицина. 124 (1), стр. 71-81, януари 2000 г.

За автора

Сара Яновска, доктор по медицина в интердисциплинарни докторантури в областта на фармацевтичните и биомедицинските науки в Медицинския университет в Люблин и Института по биотехнологии в Белосток. Тя получава магистърска степен, защитавайки дисертация в областта на фармацевтичната ботаника за антиоксидантните свойства на екстракти, получени от двадесет вида мъхове. В момента в своята изследователска работа той се занимава със синтеза на нови противоракови вещества и изследването на техните свойства върху раковите клетъчни линии. Две години тя работи като магистър по фармация в отворена аптека.

Прочетете повече от този автор